Курсовая работа на тему: Структура мембранных белков. Выделение мембранных белков. Солюбилизация мембранных белков

Введение

Цель работы: ознакомление с методами изучения мембранных белков.

Поставленная цель раскрывается через следующие задачи:

исследовать структуру мембранных белков;

рассмотреть методы их выделения и очистки;

методы исследования характеристик мембранных белков.

Известно, что более трети структурной части генома кодирует мембранные белки, однако среди известных пространственных структур лишь менее половины процента принадлежит белкам этого класса.

При этом их роль в организме трудно переоценить. Большое количество функционально значимых белков являются мембранными: рецепторы, каналы, различные ферменты и пр. Кроме того, многие из них являются мишенями для лекарственных препаратов: более 70% существующих лекарственных средств действуют именно на мембранные белки. Таким образом, изучение механизмов функционирования мембранных белков необходимо, а одним из первых шагов к пониманию механизма является получение пространственной структуры.

Оглавление

- Введение.

- Структура мембранных белков.

- Выделение мембранных белков.

- Солюбилизация мембранных белков.

- Периферические белки.

- Характеристика очищенных интегральных мембранных белков.

- Определение молекулярной массы субъединиц электрофорез в ПААГ.

- Определение молекулярной массы нативного белка с помощью гидродинамических методов.

- Метод радиационной инактивации.

- Спектральные методы.

- Метод кругового дихроизма.

- Инфракрасная спектроскопия и спектроскопия комбинационного рассеяния.

- ЯМР-спектроскопия.

- Определение ферментативной активности.

- Изучение стехиометрии субъединиц.

- Изучение трехмерной структуры с помощью рентгеновской дифракции и реконструкции изображения.

- Кристаллизация мембранных белков.

- Реконструкция изображения и двумерные кристаллы.

- Пример структурных исследований мембранных белков.

- Структура поринов.

- Заключение.

- Список литературы.

Заключение

Исследование мембранных белков все еще остается трудной задачей, требующей оригинальных подходов и нетривиальных решений. Тем не менее, каждый год появляются все новые сообщения о совершенствовании уже имеющихся методов. С разработкой новых методов очистки мембранных белков, основанных на применении различных детергентов, а так же с использованием методов секвенирования ДНК удается получить новую информацию о структуре мембранных белков. Данные по вторичной и четвертичной структуре очищенных мембранных белков можно получить с помощью биохимических и спектроскопических методов. Однако для построения моделей с высоким разрешением следует применять рентгеноструктурный анализ. Показательным в этом отношении является успех, достигнутый при изучении реакционных центров бактерий.

Список литературы

- Геннис Р. Биомембраны: Молекулярная структура и функции: Пер. с англ. - М.: Мир, 1997,-624с.

- Финдель Дж. Б., Эванз У.Г. Биологические мембраны. Методы: Пер. с англ. - М.: Мир, 1990, - 424с.

- Фаллер Дж. М., Шилдс Д. Молекулярная биология клетки. Руководство для врачей: пер. с англ. - М.: Бином - Пресс, 2004,-272с.

- Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия Москва, Просвещение.

- Лефковитс И., Пернис Б. Иммунологические методы исследований(3 том) Пер. с англ. - М.: Мир, 1988,-530с.

- Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. Москва, "Медицина", 1998 год,-704с.

- Сим Э. Биохимия мембран: Пер. с англ. - М.: Мир, 1985,-110с.