
на первый
заказ
Дипломная работа на тему: Ходе выполнения работы экспериментально установлена изменчивость экспрессивности признака cubitus
Купить за 600 руб.Введение
Мобильные генетические элементы (МГЭ) являются составной частью всех изученных геномов как про- так и эукариотических организмов [21]. Не смотря на то, что МГЭ широко распространены в геномах разных видов, большинство экспериментально доказанных представлений о механизмах их активности и контроля перемещений связаны с исследованиями на дрозофиле [2]. Так, мобильные генетические элементы представляют собой дискретные сегменты ДНК, которые могут перемещаться из одного местоположения в другое внутри хромосом или между ними. Геном Drosophila melanogaster содержит около 50-ти различных семейств мобильных генетических элементов, которые вместе составляют 10-15 % ДНК этого вида. Число копий элементов отдельных семейств варьирует от нескольких до сотни, и при активации они могут оказывать значительное влияние на функционирование генома и на генетическую изменчивость [31].МГЭ имеют несколько механизмов перемещения и могут выполнять разные функции, в связи с чем, активация различных семейств мобильных элементов может иметь как отрицательные, так и положительные последствия для генома хозяина [29].
Выяснение механизмов действия МГЭ на геном эукариот является в настоящее время одной из наиболее актуальных проблем современной генетики. Показано, что транспозиционная активность МГЭ является основным источником мутагенеза и что существенную роль в регуляции мутабильности в природных популяциях дрозофил играет семейство Р- и hobo- транспозонов, активность которых максимальна в условиях Р-М и Н-Е системах гибридного дисгенеза соответственно [39]. Широкое географическое распространение этих транспозонов и их причастность к вспышкам частот мутаций значительно усилило интерес к изучению популяций, имеющих Р- и hobo-цитотип. Тем более что аналогичные генетические структуры обнаружены и у других высших организмов, в том числе и у млекопитающих [25].
К настоящему времени накоплены следующие данные. Большая часть генных мутаций у дрозофилы - это результат инсерций МГЭ. Инсерции МГЭ могут изменять активность генов, так как в своей структуре содержат мотивы систем управления (регуляторные элементы генов) и энхансеры, состоящие из нескольких модулей, и поэтому они обладают способностью связываться с различными регуляторными белками, активирующими процесс транскрипции. Такая способность мобильных элементов изменять (понижать или повышать) уровень активности близлежащих генов оказалась достаточно неожиданной [40]. Изучение первичной последовательности МГЭ выявило, что в их структуре есть большое количество регуляторных сайтов и сигнальных последовательностей. Это значит, что МГЭ могут очень интенсивно воздействовать на работу гена, не разрушая сам ген. В результате кроссинговера между МГЭ могут возникать хромосомные перестройки различных типов: инверсии, дупликации и делеции. МГЭ могут достраивать теломерные концы хромосом. МГЭ могут участвовать в горизонтальном переносе генов. МГЭ могут откликаться "вспышкой транспозиций" при различных стрессовых воздействиях на геном. Такие МГЭ, как Р- и hobo-транспозоны (и некоторые другие) обладают способностью вызывать синдром гибридного дисгенеза, что проявляется у потомства в виде повышенной частоты генных мутаций, хромосомных аберраций и нерасхождения хромосом, явления рекомбинации у самцов, а также стерильности гибридов [34].
Перемещения МГЭ у дрозофилы происходят преимущественно в клетках зародышевого пути. Попытки выявить активность МГЭ в клетках соматических тканей долгое время не были успешными, и сохранялось представление о том, что перемещения МЭ у дрозофилы ограничены половыми клетками [3]. Большая часть таких работ была проведена с использованием генетических методов и моделей на линиях Drosophila melanogaster при Р-М-гибридном дисгенезе. Молекулярными методами было подтверждено, что перемещения Р-элемента в клетках соматических тканей заблокированы за счет особенностей сплайсинга [22]. Для hobo-элемента так же предполагается тканеспецифичная регуляция продукции транспозазы, но на уровне транскрипции [28]. В ряде работ описаны случаи перемещения ретротранспозонов в соматических тканях у высших организмов [26]. Что касается транспозонов, до сих пор сохраняется неясность в вопросе о возможности их перемещения в соматических клетках у Drosophila melanogaster. Выявление возможности и изучение особенностей транспозиций МГЭ в соматических клетках имеет большое значение, поскольку в ряде работ описан повреждающий эффект соматических перемещений Р-элемента [34]. Одной из важных причин повышенного интереса к соматическим эффектам активного перемещения МГЭ является потенциальная угроза малигнизации клеток при соматическом мутагенезе.
Цель работы: установить изменяется ли экспрессивность признака cubitus interruptus Dominant Drosophila melanogaster при индукции синдрома гибридного дисгенеза.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
Провести поиск и анализ литературы по теме исследования.
Освоить лабораторные методы работы с дрозофилой.
Поставить скрещивания самок линии ciDC-S D. melanogaster с самцами из линий, содержащих Р- или hobo-элемент, для индукции синдрома гибридного дисгенеза.
Проанализировать изменчивость проявления признака cubitus interruptus Dominant у особей с гибридным дисгенезом и без, потомков одних родителей.
Оглавление
- Введение- Обзор литературы
- Мобильные элементы D.melanogaster как индукторы гибридного дисгенеза
- Явление и значение атрофии гонад, как признака гибридного дисгенеза
- Соматические проявления гибридного дисгенеза и механизмы их формирования
- Связь экспрессивности признака cubitus interruptus Dominant с экспрессией гена ciD
- Материалы и методы исследования
- Модельный объект
- Материал исследования
- Методы исследования
- Схема эксперимента
- Тест на атрофию гонад
- Методика оценки экспрессивности признака cubitus interruptus Dominant
- Методы статистического анализа
- Охрана труда
- Результаты и обсуждения Выводы
- Список литературы
Список литературы
Гинтер Е.К. Насекомые. В сб. "Методы биологии развития". // Ред. Детлаф Т.А. , "Наука",- 1974, 272-281 с.Голубовский М.Д. 1972. Некоторые общие характеристики организации генома и фенотипического проявления мутаций у дрозофилы. // Генетика - 1972.- Т. 8, № 5 - 143-157 с.
Антоненко О.В. Роль мобильных генетических элементов в отклике на селекцию по количественным признакам у Drosophila melanogaster. - Автореф. дис. канд. биол. наук. - Новосибирск ,- 2008. - 18 с.
Васильева Л.А. Изменение системы жилкования крыла Drosophila melanogaster под действием температурного шока и селекции // Журнал общей биологии. - 2005. - Т.66, №1. - С. 68-74.
ГОСТ 12.1.004-91 ССБТ. Пожарная безопасность. Общие требования. - Введ. 01.07.86; ГОСТ 12.1.004-91. ССБТ. Пожарная безопасность. Общие требования.- Чинний вiд 01.07.92.
ДНАОП - державний нормативний акт з охорони працi - 0.00 -4.12 - 99 "Типове положення про навчання з питань охорони працi"
ДСТ 12.0.003-74. ССБТ. Небезпечнi i шкiдливi виробничi фактории. Класифiкацiя.
ДСТУ ISO 14004-97 Системи управлiння навколишнiм середовищем. Загальнi настанови щодо принципiв управлiння, систем та засобiв забезпечення. - Чинний вiд 18.08.97.
ЗАКОН УКРАЇНИ "Про державну систему бiобезпеки при створеннi, випробуваннi, транспортуваннi та використаннi генетично модифiкованих органiзмiв". Документ 1103-16 <http://www.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=1103-16>, остання редакцiя вiд 09.02.2010 <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=1103-16&с=1> на пiдставi 1804-17, чинний [http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=1103-16].
Закон України "Про охорону навколишнього середовища" вiд 25.06.91.
Охорона працi (Законодавство. Органiзацiя роботи): Навч. посiб. / За заг. ред. к.т.н., доц. I. П. Пiстуна. - Львiв: "Трiада плюс", 2010.- 648 с.
ПОСТАНОВА КМУ вiд 6 травня 2000 р. N 770 "Про затвердження перелiку наркотичних засобiв, психотропних речовин i прекурсорiв" - Документ 770-2000-п <http://www.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=770-2000-%ЕF>, остання редакцiя вiд 06.04.2011 <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=770-2000-%ЕF&с=1> на пiдставi 327-2011-п <javascript:OpenDoc('327-2011-п')>; <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=770-2000-%ЕF>
ПОСТАНОВА КМУвiд 20 червня 1995 р. N 440 - "Про затвердження Порядку одержання дозволу на виробництво, зберiгання, транспортування, використання, захоронення, знищення та утилiзацiю отруйних речовин, у тому числi продуктiв бiотехнологiї та iнших бiологiчних агентiв" - Документ 440-95-п <http://www.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=440-95-%ЕF>, редакцiя вiд 06.01.2010 на пiдставi 1391-2009-п <javascript:OpenDoc('1391-2009-п')>; <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=440-95-%ЕF>
Правила устройства электроустановок. ПУЭ. Минэнерго СССР. - М.: Энергоатомиздат, 1987.
Про захист населення вiд iнфекцiйних хвороб" - Документ 1645-14 <http://www.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=1645-14>, остання редакцiя вiд 11.06.2009 <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=1645-14&с=1> на пiдставi 1254-17 <javascript:OpenDoc('1254-17')>, чинний; <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=1645-14>
"Про забезпечення санiтарного та епiдемiчного благополуччя населення" - Документ 4004-12 <http://www.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=4004-12>, поточна редакцiя вiд 12.03.2011 <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=4004-12&с=1> на пiдставi 3038-17 <javascript:OpenDoc('3038-17')>, чинний (Редакцiя вiдбудеться 12.06.2011 на пiдставi 3038-17 <javascript:OpenDoc('3038-17')>) <http://zakon1.rada.gov.uа/cgi-bin/laws/main.cgi?nreg=4004-12>://flybase.org/reports/FBgn0004859.html
Атраментова Л. О., Утєвськая О. М. Статистичнi методи в бiологii: Пiдручник. - Х.: ХНУ iм. В. Н. Каразiна, 2007. - 288 с.
Жимулев И.Ф; под ред. Е.С. Беляева, А.П. Акифьева. Общая и молекулярная генетика - 4-е изд. - Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2007. - 479 с.: ил.
Коваленко Л.В. hobo-элемент как фактор нестабильности генома Drosophila melanogaster в клетках генеративных и соматических тканей // Автореферат диссертации на соискание уч. степени к.б.н. -Российская академия наук. Сибирское отделение. Институт цитологии и генетики. - 2007. - 116 с.
Козерецкая И.А. Мобильные генетические элементы Drosophila melanogaster. Популяционно-генетический аспект.// Вiсник Укр..тов-ва. генетикiв i селекцiонерiв. - 2010.-Том 8, № 1.- 23 с.
Юшкова Е.А. Влияние хронического облучения в малых дозах на динамику изменчивости экспериментальных популяций Drosophila melanogaster, отличающихся по содержанию мобильных Р-элементов. // Автореферат диссертации на соискание уч.степени к.б.н. - Москва. - 2008. - 24 с.
Васильева Л.А., Захаров И.К. Селекция изменяет паттерн мобильных генетических элементов в геноме Drosophila melanogaster.// Вестник ВОГиС. - 2008. - Том 12, №3. - 412-424 с.
Вассерлауф И.Ф. Изменение организации хромосом в ядрах трофоцитов яичников Drosophila melanogaster при инбридинге и гибридном дисгенезе.// Вестник Томского государственного ун-та. - 2008. -. №316. - 178-186 с.
Голубовский М.Д. Нестабильность генов и мобильные элементы: к истории изучения и открытия.// Университет Калифорнии, Беркли, США; mdgolub@gmail.com. Историко-биологические исследования. - 2011. - Том 3, №4. - 60-76 с.
Буфф Е.М., Симонова О.Б. Участие мобильного элемента hobo в транспозицонных событиях в системе продлённой нестабильности у Drosophila melanogaster // Генетика. - 1992. - Т.28, №12. - 73-79 с.
Иващенко Н.И., Гришаева Т.М. Особенности индуцированного мутагенеза в системах гибридного дисгенеза у Drosophila melanogaster //Генетика.. - 2002. - Т. 38, №10. - 1351-1356 с.
Коваленко Л.В., Захаренко Л.П. Транспозиции hobo-элемента в соматических клетках Drosophila melanogaster // Генетика.. - 2006. - Т. 42., №2. - 177-184 с.
Юрченко Н.Н., Коваленко Л.В. Мобильные генетические элементы: нестабильность генов и геномов.// Вавиловский журнал генетики и селекции. - 2011.- Том 15, №2.- 261-266 с.
Кварец А.П., Мюссе Т.А. Динамика частоты гибридного дисгенеза у Drosophila melanogaster в контролируемых условиях хронического облученя.// Вестник Цитология и генетика.- 2010. - №3.- 21-26 с.
Голубовский М.Д. Век генетики: эволюция идей и понятий.// СПб.:Борей Арт.- 2000.81-96 с.
Артаманова В.С., Махров А.А. Генетические системы как регуляторы процес сов адаптации и видообразования (к системе микроэволюции).// Эволюционная теория: история и современность.- 2006. 381-396 с.
Шапошников М, Москалёв А. Половой диморфiзм продолжитеьности жизни у Drosophila melanogaster // Вестник института биологии Коми НЦ УрО РАН.- 2006.- № 10(108)- 3-6 с.
Захаренко Л.П., Перепелкина М.П. Изменение распределения мобильных генетических элементов в геноме Drosophila melanogaster - причина или следствие селекции по количественным признакам? // Цитология.-2009.- Том 52, № 6 - 487-491 с.
Методические указания к практическим зпнятиям по большому практикуму. Генетический анализ Drosophila melanogaster.// Начальник: Каб. - Балк. Ун-т.- 2009. - 54 с.
Козак М.Ф. Дрозофила - модельный объект генетики. // Уч.-методическое пособие. - Астрахань: Издательский дом "Астраханский университет". - 2007.- 87 с.
Harald Eggert. Molecular Screening for Р-Elrment in а Large Genomic Region оf melanogaster Using Polimerase Chain Reaction Mediated by the Vectorette // Genetics. - 1998. - V. 149. - Р. 1427-1433.
Ronsseray S <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Ronsseray%20S%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=6090865>. Hybrid dysgenesis in Drosophila melanogaster: influence оf temperature оn cytotype determinatiоn in the Р-М system // Mol Gen Genet. -1984.-Р. 17-23.А. Drosophila I-R hybrid dysgenesis is associated with catastrophic meiosis and abnormal zygote formatiоn // Journal оf Cell Science.- 2000.-Р. 43-54.Р. van Rij1 and Eugene Berezikov. Small RNAs and the control оf transposons and viruses in Drosophila. // Elsevier Ltd. All rights reserved .-2009. - Р. 163-170.J. Miller Pierre Capy. Mobile Genetic Elements. // From: Methods in Molecular Biology. - 2006.- Р. 32-45.S., М. BERLOCO, L. FANT, Р. DIMITRI, S.BONACCORSI, Е. MARCHETTI, R. CAIZZI. Transposable elements are stable structural components оf Drosophila melanogaster heterochromatin. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA .- 1995. - Р. 3804-3808.
Orenic ТV <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Orenic%20TV%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=2166702>, Slusarski DС <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Slusarski%20DC%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=2166702>, Kroll КL <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Kroll%20KL%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=2166702>, Holmgren RА <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Holmgren%20RA%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=2166702>. Cloning and characterization оf the segment polarity gene cubitus interruptus Dominant оf Drosophila. // Genes Dev. <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2166702> - 1990.- Р. 1053-67.
Orenic Т <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Orenic%20T%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=3666312>, Chidsey J <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Chidsey%20J%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=3666312>, Holmgren R <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Holmgren%20R%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=3666312>. Cell and cubitus interruptus dominant: two segment polarity genes оn the fourth chromosome in Drosophila. // Dev Biol. <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3666312> - 1987.- Nov;124(1).- Р. 50-65.Hepker, Qun-Tian Wang, Cynthiа К. Motzny, Robert Holmgren and Teresа Vales Orenic. Drosophilа cubitus interruptus forms а negative feedback loop with patched and regulates expressiоn оf Hedgehog target genes. // Development . -1997. - Р. 549-558.J. Clock Mutants оf Drosophilа melanogaster.// Dev Biol.- 1971. -Vol. 68, Nо. 9. - Р. 2112-2116.
Бiлоусов О.О., Козерецька I.А.. Поширення мобiльного елементу hobo в природних популяцiях D. melanogaster України // Дрозофiла в експериментальнiй генетицi та бiологiї: сб. научн. статей. - Х.: ХНУ, 2008. - С. 76-78 с.
или зарегистрироваться
в сервисе
удобным
способом
вы получите ссылку
на скачивание
к нам за прошлый год