Решение задач на тему: Ходе исследования были собраны данные, необходимые для анализа бациллярно-кокковой трансформации в

Введение

elicobacter pylori - это короткая, граммотрицательная, извитая, микроаэрофильная бактерия, инфицирование которой может привести к развитию хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, желудочной лимфомы и аденокарциномы [1-3]. В организме хозяина Н.pylori в основном присутствует в спиральной форме, но может трансформироваться в латентную кокковую форму под воздействием стрессовых условий. Некоторые исследователи считают, что такая форма является морфологическим проявлением дегенерации и гибели клетки. Однако большинство авторов склоняются к тому, что кокковые формы жизнеспособны, но некультивируемы, хотя сохраняют клеточную структуру и поддерживают метаболизм и экспрессию белков. Кокковые формы Н.pylori переносят более широкий диапазон рН, в большей степени, чем спиралевидные формы устойчивы к неблагоприятным факторам и антибиотикам и при этом не утрачивают вирулентность. Превращение спиралевидных форм Н.pylori в кокковые в слизистой оболочке желудка (СОЖ), так же как и в культуральной среде, возможно, обусловлено накоплением токсических продуктов жизнедеятельности Н.pylori .

Внутрижелудочная бактериальная инфекция Н.pylori является одним из основных этиологических факторов кислотозависимых заболеваний, к которым в первую очередь относится язвенная болезнь (ЯБ). Таким образом, если признавать прямую связь между инфицированием желудка Н.pylori и ЯБ, то и сезонные обострения ЯБ могут быть связаны с активностью бактериальных клеток, инфицирующих СОЖ. Учитывая, что бактериальные клетки Н.pylori проявляют бациллярно-кокковый диморфизм (т.е. присутствуют в СОЖ в спиралевидных и кокковых формах), то бациллярно-кокковая трансформация (переход спиралевидных форм в кокковые и наоборот) может рассматриваться как проявление активности жизнедеятельности этого микроба в СОЖ.

Идентифицировать кокковые формы Н.pylori методом прямой бактериоскопии возможно, если применять иммуноцитохимический метод (ИЦХ), в котором используются антитела, специфичные к антигенам клеточной стенки Н.pylori. В мазках из СОЖ, окрашенных на Н.pylori ИЦХ методом, можно определять процент встречаемости спиралевидных вегетативных форм, переходных U-форм и кокковых форм бактериальных клеток Н.pylori. В лаборатории цитологических исследований ВЦЕРМ имени А.М. Никифорова МЧС России на протяжении 8 лет проводились широкомасштабные ИЦХ исследования Н.pylori в СОЖ, причем, ежемесячно этим методом исследовалось в среднем 55 человек. Таким образом, целью данного дипломного проекта было создание базы данных, необходимой для установления сезонной зависимости показателя "степень обсемененности СОЖ кокковыми формами", и изучение сезонного биоритма бациллярно-кокковой трансформации Н.pylori в антральном отделе желудка.

Следует отметить, что архив препаратов, в которых определена частота встречаемости кокковых форм, был получен из прямых мазков-отпечатков гастробиоптатов, в которых наряду с клетками покрово-ямочного эпителия, лимфоидными элементами и лейкоцитами, и, собственно, бактериальными клетками Н.pylori, могли присутствовать бактерии-кокки, не относящиеся к Н.pylori. Такая кокковая флора в присутствии эндогенного биотина и пероксидазы, продуцируемой лейкоцитами, а так же в результате опсонизации бактерий вполне могла окрашиваться хромогеном ДАБ и на неспецифицеском фоне овыглядеть идентично кокковым формам Н.pylori. В настоящее время стандартом в ИЦХ методе является пробоподготовка клеточного материала (в том числе должны рассматриваться и бактериальные клетки) технологией жидкостной цитологии (ЖЦ). ЖЦ предусматривает получение отмытого от неспецифического фона материала в виде клеточной суспензии, с последующим цитоцентрифугированием на предметное стекло. В полученных монослойных мазках-цитоцентрифугатах проводят ИЦХ исследование, которое исключает неспецифическое окрашивание.

Целью нашего исследования стало проведение контрольных ИЦХ исследование гастробиоптатов методом ЖЦ на предмет присутствия в них истинных кокковых форм, а так же определение их частоты встречаемости (%) от всех бактериальных клеток Н.pylori.

После установления соответствия данных ИЦХ, включающих ЖЦ-пробоподготовку и данных, полученных с препаратов прямым методом, мы использовали базу архива для установления сезонного цикла показателя "степень обсемененности кокковыми формами".

Оглавление

- Введение

- Аналитический обзор

- История исследований

- Морфология и метаболизм Helicobacter pylori

- Патогенность Н. pylori

- Механизм развития воспалительных заболеваний

- Бациллярно-кокковая трансформация Н. pylori

- Кокковые формы Н. pylori

- Механизмы возникновения кокковых форм из бациллярных

- Иммуноцитохимический метод диагностики

- Сезонность инфекционных заболеваний

- Сезонность Н.pylori-ассоциированных заболеваний

- Цели и задачи работы

- Экспериментальная часть

- Характеристика исходных данных

- Результаты жидкостной иммуноцитохимии

- Количественная и полуколичественная оценка степени обсемененности СОЖ кокковыми формами

- Сезонный биоритм активности бациллярно-кокковой трансформации Н.pylori в слизистой оболочке желудка Выводы

- Список литературы