Курсовая работа: Подавление экспрессии гена EGFP в клетках с использованием конъюгатов олигонуклеотида с пиреном

Исследование направлено на подавление экспрессии гена EGFP в клетках с помощью конъюгатов олигонуклеотида с пиреном. Ген EGFP, кодирующий зеленый флуоресцентный белок, активно используется в биомедицинских исследованиях как маркер для визуализации клеточных процессов. С целью разработки эффективных методов регулирования экспрессии этого гена применяются специфические молекулы-основания, в данном случае олигонуклеотиды, соединенные с флуоресцентным зондом пиреном.

Пирен, будучи сильным флуорофором, обеспечивает возможность отслеживания изменений в клетках в реальном времени. Олигонуклеотиды, конъюгированные с пиреном, доставляются в клетки, где они связываются с мРНК EGFP, блокируя её трансляцию и тем самым снижая уровень экспрессии белка. Эффективность такого подавления была протестирована на клеточных культурах, что позволило установить оптимальные условия для интерактивного связывания.

На различных стадиях эксперимента использовались методы количественной ПЦР и флуоресцентной микроскопии для анализа уровня выражения гена. Результаты продемонстрировали заметное снижение флуоресценции в клетках, обработанных конъюгированными олигонуклеотидами, в отличие от контрольной группы, что подтверждает успешность подавления EGFP. Эти данные открывают новые перспективы для использования олигонуклеотидов как инструментов генной терапии и регуляции генов с высокой точностью, что станет основой для дальнейших исследований в области молекулярной биологии и разработки новых методов лечения заболеваний.